緩慢移動原則：為了避免影響正常的風路狀態(tài)，柜內(nèi)操作時手應(yīng)該盡量平緩移動。
物品平行擺放原則：為了避免物品和物品之間的交叉污染現(xiàn)象產(chǎn)生，在柜內(nèi)擺放的物品應(yīng)該盡量呈橫向一字擺開，避免回風過程中造成交叉污染。同時避免堵塞背部回風隔柵影響正常風路。
避免震動原則：柜內(nèi)盡量避免震動儀器（例如離心機、旋渦振蕩器等）的使用，因為震動會使得積留在濾膜上的顆粒物質(zhì)抖落，導致操作室內(nèi)部潔凈度降低，同時如果在前操作面平衡失敗還會引起安全柜對操作者的污染。
不同樣品柜內(nèi)移動原則：柜內(nèi)兩種及以上物品需要移動時，遵循低污染性物品向高污染性物品移動原則，避免污染性高的物品在移動過程中產(chǎn)生對柜體內(nèi)部的大面積污染。
生物安全柜操作注意事項：
操作前應(yīng)將本次操作所需的全部物品移入安全柜，避免雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流；并且在移入前用75%酒精擦拭表面消毒，以去除污染。
打開風機5～10分鐘，待柜內(nèi)空氣凈化并氣流穩(wěn)定后再進行實驗操作。將雙臂緩緩伸入安全柜內(nèi)，至少靜止1分鐘，使柜內(nèi)氣流穩(wěn)定后再進行操作。
安全柜內(nèi)不放與本次實驗無關(guān)的物品。
柜內(nèi)物品擺放應(yīng)做到清潔區(qū)、半污染區(qū)與污染區(qū)基本分開，操作過程中物品取用方便，且三區(qū)之間無交叉。
物品應(yīng)盡量靠后放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。
操作時應(yīng)按照從清潔區(qū)到污染區(qū)進行，以避免交叉污染。
為防可能濺出的液滴，可在臺面上鋪一用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全柜格柵。
柜內(nèi)操作期間，嚴禁使用酒精燈等明火，以避免產(chǎn)生的熱量產(chǎn)生氣流，干擾柜內(nèi)氣流穩(wěn)定；且明火可能損壞HEPA濾器。
工作時盡量減少背后人員走動以及快速開關(guān)房門，以防止安全柜內(nèi)氣流不穩(wěn)定。
在實驗操作時，不可打開玻璃視窗，應(yīng)保證操作者臉部在工作窗口之上。在柜內(nèi)操作時動作應(yīng)輕柔、舒緩，防止影響柜內(nèi)氣流。
安全柜應(yīng)定期進行清潔消毒，柜內(nèi)臺面污染物可在工作完成且紫外燈消毒后用2%的84消毒液擦拭。柜體外表面則應(yīng)每天用1%的84消毒液擦拭。
柜內(nèi)使用的物品應(yīng)在消毒后再取出，以防止將病原微生物帶出而污染環(huán)境。
安全柜應(yīng)定期進行檢測與保養(yǎng)，以保證其正常工作。工作中一旦發(fā)現(xiàn)安全柜工作異常，應(yīng)立即停止工作，采取相應(yīng)處理措施，并通知相關(guān)人員。
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